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佰利莱生物试剂盒常用方法及原理

更新时间:2023-04-11      浏览次数:374

佰利莱生物主营产品:
1.Elisa试剂盒系列:
ELISA试剂盒在国内有许多种叫法,例如:ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。
ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来,得到众多科研实验工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。
Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
可检测种属 
(人,小鼠,大鼠,植物,鱼,虾,蟹,牛,羊,狗,猫,微生物,细胞,土壤等动植物)
可以检测样为
(血清,血浆,唾液,尿液,组织,细胞上清,裂解液等)
产品检测目的:
样本水平表达(定量检测,定性检测,酶活性检测)
规格:96T 可以检测89个样  48T可以检测41个样
备注:6个标准一个空白对照
有效期:6个月 保存2-8°C
佰利莱生物elisa试剂盒的优点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、最大限度的节省实验经费。
佰利莱生物常用方法及原理如下:
1. 夹心法:
夹心法常用于检测大分子抗原,一般的操作步骤为:
a. 将具有专一性的抗体固著(coating)于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体
b. 加入待测检体,检体中若含有待测的抗原,则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结
c. 洗去多余待测检体,加入另一种对抗原专一的一次抗体,与待测抗原进行键结
d. 洗去多余未键结一次抗体,加入带有酶的二次抗体,与一次抗体键结
e. 洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或仪器读取呈色结果

原理:针对抗原分子上2个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物。

2. 间接法:

间接法常用于检测抗体,一般的操作步骤为:
a. 将已知的抗原固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余的抗原。
b. 加入待测检体,检体中若含有待测的一次抗体,则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结。
c. 洗去多余待测检体,加入带有酶的二次抗体,与待测的一次抗体键结。
d. 洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酶呈色,藉仪器(ELISA reader)测定塑胶盘中的吸光值(OD值),以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。
原理:利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体。
3. 竞争法:
竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制,一般用于检测小分子抗原,其操作步骤为:
a. 将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体
b. 加入待测检体,使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结
c. 加入带有酶的抗原,此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结,由于塑胶孔盘上固著的抗体数量有限,因此当检体中抗原的量越多,则带有酶的抗原可键结的固著抗体就越少,亦即,两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗体键结,即所谓竞争法之由来。
d. 洗去检体与带有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,当检体中抗原量越多,代表塑胶孔盘内留下之带有酶的抗原越少,显色也就越浅。
e. 当需要侦测无法获得两种以上单一性抗体的抗原,或是不易得到足够的纯化抗体以固著于孔盘上时,一般会考虑使用竞争法ELISA。
原理:将特异性抗体包被于固相载体表面,经洗涤后分成两组:一组加酶标记抗原和被测抗原的混合液,另一组只加酶标记抗原,经孵育洗涤后加底物显色,这两组底物降解量之差,即为所要测定的未知抗原的量。


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