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微藻抗坏血酸过氧化物酶(APX)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法1.细胞上清液: 3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。2.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清.3.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻.
联系电话:19121610072
微藻抗坏血酸过氧化物酶(APX)ELISA试剂盒品牌:佰利莱
应用:定量/酶活检测
有效期:6个月
试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
说明书 | 1份 | 1 | R.T. |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | R.T. |
密封袋 | 1个 | 1个 | R.T. |
酶标包被板 | 1*48 | 1*96 | 2-8℃保存 |
标准品:27ng/ml | 0.5ml*1瓶 | 0.5ml*1瓶 | 2-8℃保存 |
标准品稀释液 | 1.5ml*1瓶 | 1.5ml*1瓶 | 2-8℃保存 |
酶标试剂 | 3ml*1瓶 | 6ml*1瓶 | 2-8℃保存 |
样品稀释液 | 3ml*1瓶 | 6ml*1瓶 | 2-8℃保存 |
显色剂A液 | 3ml*1瓶 | 6ml*1瓶 | 2-8℃保存 |
显色剂B液 | 3ml*1瓶 | 6ml*1瓶 | 2-8℃保存 |
终止液 | 3ml*1瓶 | 6ml*1瓶 | 2-8℃保存 |
浓缩洗涤液 | ( 20ml*20倍)*1瓶 | (20ml*30倍)*1 瓶 | 2-8℃保存 |
操作流程:
(1)产品仅用于科研待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的工作液100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,zui终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
微藻抗坏血酸过氧化物酶(APX)ELISA试剂盒的使用常识:
(1)试剂切忌与手接触(有些试剂有强腐蚀性、等特性)。
(2)要用洁净的药勺,量筒或滴管取用试剂,绝不允许用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后,应将工具洗净(药勺要擦干)后,才可取用另一种试剂。
(3)试剂取用后一定要将瓶塞盖紧,不可放错瓶盖和滴管,绝不允许张冠李戴,用完后请及时将瓶放回原处,以免遗忘,带来不便。
(4)已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内(怕产生原试剂的再次污染)。
免责声明:
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
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