热门搜索: 96T/48T植物渗调蛋白(Osmotins)ELISA试剂盒 96T/48T植物茉莉酸甲酯(MeJA)ELISA试剂盒 96T/48T植物茉莉酸(JA)ELISA试剂盒 96T/48T植物可溶性淀粉(s-starch)ELISA试剂盒 96T/48T植物果聚糖合成酶(FBEs)ELISA试剂盒 96T/48T植物果胶酯酶(Pectinesterase)ELISA试剂盒 96T/48T植物独脚金内酯(SLs)ELISA试剂盒 96T/48T植物赤霉素3(GA3)ELISA试剂盒 96T/48T植物丙二烯氧化物合酶(AOS)ELISA试剂盒 96T/48T植物NADP苹果酸酶(NADP-ME)ELISA试剂盒 96T/48T微生物葡萄糖苷酶(Glucosidase)ELISA试剂盒 96T/48T微生物脂肪酶(Lipase)ELISA试剂盒 96T/48T微生物胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)ELISA试剂盒 96T/48T微生物蛋白质水解酶(protease)ELISA试剂盒 96T/48T微生物甲酸脱氢酶(FDH)ELISA试剂盒 96T/48T微生物半乳糖苷酶(GAL)ELISA试剂盒

技术文章/ Technical Articles

您的位置:首页  /  技术文章  /  ELISA实验前需要准备哪些仪器和试剂

ELISA实验前需要准备哪些仪器和试剂

更新时间:2024-03-22      浏览次数:472

  ELISA技术自20 世纪70年代初问世以来,发展非常迅速,目前被广泛应用于免疫学、医学、生物学等许多领域。其基本原理是根据抗原或抗体能在一定条件下结合到固相载体的表面仍保持其免疫活性,抗原或抗体与酶结合形成的结合物仍能保持免疫学和酶的活性。结合物与相应的抗原、抗体结合后,可根据加入相应的酶底物的颜色反应来判断有无相应的免疫反应,而且颜色的深浅与相应的抗原或抗体的量在一定的范围内成正比。由于抗原、抗体的反应在1 种固相载体——聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证实验结果的特异性与稳定性。了解实验原理后同时也必须做好实验的前期准备。638128444826963505563.png一、仪器准备:

酶标仪(ELISA Reader),微量可调加样器1套(10、20、100、200、1000 μL),恒温培养箱,pH 计,冲洗器,洗涤瓶,康氏管,50 mL烧杯,吸管。96孔酶标板或48孔酶标板。

二、试剂准备:

1. 包被液:0.05 M pH9.6碳酸盐缓冲液(Na2CO3 1.59 g, NaHCO3 2.93 g, 加水至1000 mL,4℃可保存1周)。

2. 封闭液:5% 脱脂奶粉或0.3% BSA

3. 洗涤液:0.15 M pH7.4 PBS-T(0.2 g KH2PO4,2.9 g Na2HPO4?12H2O,8 g NaCl, 0.2 g NCl,0.5mL Tween-20,加水至1000 mL,4℃保存)

4. 底物液:pH5.0 的磷酸盐-柠檬酸缓冲液(0.1 M 柠檬酸24.3 mL,0.2 M磷酸盐25.7 mL,加水50 mL,混匀),临用前,在上述缓冲液中溶解40 毫克邻苯二胺(Ortho-Phenglendiaruine, OPD),然后加入30%双氧水0.15 毫升,底物对光敏感,需要避光并立即使用。

5. 阳性对照液:1:100用HAT培养基稀释的小鼠血清。阴性对照液为HAT培养基

6. 辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG 酶标结合物。

7. 2 M H2SO4

8. 抗原溶液


微信扫一扫

邮箱:2924516602@qq.com

传真:02166566405、19121610072

地址:上海市奉贤区金海公路6055号11幢5层

Copyright © 2024 上海佰利莱生物科技有限公司版权所有   备案号:沪ICP备2022021373号-4   技术支持:智慧城市网