激酶试剂盒是通过以下两种技术路径实现检测

更新时间：2025-08-27

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　　激酶试剂盒是一种基于激酶酶的特性设计的检测试剂盒，用于测量激酶反应中所形成的特定产物（如ADP或磷酸化产物）的量，从而间接反映激酶的活性。激酶酶能够将ATP（三磷酸腺苷）上的磷酸基团转移到特定的底物上，生成相应的磷酸化产物，同时释放出ADP（二磷酸腺苷）或AMP（一磷酸腺苷）。通过测定这些产物的生成量，可以评估激酶的活性。

　　激酶试剂盒通过检测激酶催化反应中ATP的消耗量或ADP的生成量，间接量化激酶活性。其原理基于激酶将ATP的磷酸基团转移至底物（如蛋白质、多肽或小分子），导致ATP减少或ADP增加。试剂盒通过以下两种技术路径实现检测：

　　1、化学发光法

　　原理：利用荧光素酶催化荧光素与ATP反应发光，发光强度与ATP浓度成正比。通过检测反应后剩余ATP量，推算激酶活性。

　　示例：Kinase-Lumi™试剂盒可检测0-10μM ATP，适用于蛋白激酶（如STK3/MST2）及非蛋白激酶（如糖激酶）的活性分析。

　　优势：灵敏度高（可检测低浓度ADP）、动态范围宽（适用于低活性激酶如受体酪氨s激酶）、信号稳定（发光持续数小时）。

　　2、比色法

　　原理：通过检测反应产物（如NADPH）的吸光度变化间接测定激酶活性。

　　示例：NAD激酶（NADK）试剂盒利用NADK催化NAD+生成NADP+，后者被6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原为NADPH，在340nm处吸光度增加，吸光度变化率与NADK活性成正比。

　　优势：操作简便、适用样本广泛（血清、血浆、组织、细胞等）、结果直观。

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